Das BRET-Prinzip

荧光素酶是一种荧光素蛋白,它是一种荧光素酶,它是一种荧光素酶。我们的产品包括荧光素酶(Luciferase)和荧光素受体(fluorescent erende) Molekülen zu interessantenen。研究结果表明:1 . lebenden Zellen ermöglicht es, deren在数量上的相互作用。Die Energieübertragung erfolgt durch eine nichtstrahende diol - diol - kopplung vom Donor zum Akzeptor in unmittelbarer Nähe (typischerweise innerhalb von 10 nm), was zu einer Fluoreszenzemission bei einer charakteristischen Wellenlänge führt。我们的捐献者的能量来自于BRET-Verhältnis bezeichnet。您是abhängig您的特征谱,他们是Verhältnis,他们的亲属和捐助者的弃权和Akzeptormoleküle sowie他们是Stärke和Stabilität他们和蛋白质之间的相互作用

BRET是民主党烦恼sehr ähnlich,供体荧光素蛋白的研究。我们有一个共同的研究课题benötigt,我们的捐赠人有一个共同的研究课题,我们有一个共同的研究课题,我们有一个共同的研究课题,我们有一个共同的研究课题,我们有一个共同的研究课题,我们有一个共同的研究课题,我们有一个共同的研究课题,我们有一个共同的研究课题,我们有一个共同的研究课题,我们有一个共同的研究课题,我们有一个共同的研究课题。这是一种放射性的同源基因技术和比率测量信号Störungen的最小值测试。

BRET-Methoden

在这一过程中,我们将会有更多的选择。所有的都有限制和旋涡。Verschiedene Donor- und Akzeptorpaare and die entsprechenden Wellenlängen您在folgenden Tabelle中找到:

方法 捐赠 Substrat 供体发射(nm) Akzeptor Akzeptor发射(nm)
BRET 1 RLuc Coelenterazine 480 eYFP 530
BRET 2 RLuc 深蓝C™ 395 绿色荧光蛋白 510
eBRET 2 RLuc8 深蓝C™ 395 绿色荧光蛋白 510
BRET 3 萤火虫 荧光素 565 安全域 583
QD-BRET RLuc / RLuc8 Coelenterazine 480 QDot 605
NanoBRET NanoLuc® Furimazine 460 HaloTag®配体 618

BRET 1

Die ursprüngliche BRET- methode mit Coelenterazin als Substrat heißt heute BRET 1。您给我寄来的信是好的。

BRET 2

我对捐赠者和放射者的看法是不一样的。我们有2个最好的选择für筛查von检测,我希望他Signal-Rausch-Abstände erforderlich sind。我们有一天会去Einschränkung,这是我们的梦想,是我们的梦想。

增强型BRET 2 (eBRET)

eBRET führt zu einem etwa 5-fach besseren信号在ursprünglichen BRET 2版本。eBRET verwendet eine neue renila - lucifase - mutante, Rluc8。

BRET 3

Die fireflly - luciferase in BRET 3 zeigt eine geringere zelluläre Autofluoreszenz bei der Emissionswellenlänge (565 nm), hat aber Nachteile durch schwache Signale and Überschneidungen zwischen Donor- and akzeptor - emissionspeak。

QD-BRET

Eine ganz neue bret版本是量子点bret (QD-BRET)。Die Emissionsspitzen sind klar getrent,是QD-BRET理想für筛选- anwendungen macht。Nachteile sind große Größe der QD-Moleküle (1,5 - 6 nm) and dsache, dass eine genetische Kodierung von QD-Proteinen nicht möglich ist。qd蛋白können在lebenden Zellen nicht expriert werden, sondern müssen hinzugefügt werden。

NanoBRET™

NanoBRET™verwendet eine荧光素酶,die viel heller ist als herkömmliche Luciferasen, NanoLuc®,und hat eine sehr gute Trennung zwischen给体发射(460 nm)和akzeptor发射(618 nm)。

BRET-Anwendungen

BRET kann在mikroplatattenlesern gemessen werdenProtein-Protein-Interaktionen我很抱歉,我不能帮你。Fähigkeit,在lebenden中输入Säugetierzellen,有一个很严重的问题,我们的技术是Co-Immunpräzipitation和混合筛选。Darüber hinaus ermöglicht die hohe Sensitivität von BRET die Untersuchung von Proteinen in生理学Konzentrationen, ein wesentlicher Vorteil gegenüber Techniken, die eine hohe蛋白表达erfordern。

Insbesondere im德国der蛋白gekoppelten Rezeptorforschung bietet死BRET-Technologie Moglichkeit死去,靠窗户homogenen, universellen和funktionellen化验祖etablieren der死Tatsache nutzt, dassß-Arorestin (das naturlich一张罗尔贝der Desensibilisierung der Rezeptoren spielt)一个窝intrazellularen菩提树des aktivierten Rezeptors bindet。g蛋白gekoppelte Rezeptoren, auch 7-Transmembran-(7TM)-Rezeptoren genannt, umfassen die größte和vielfältigste Überfamilie der bekannten蛋白。我可以帮你做些什么。

嗯,我们有很多关于GPCRs的研究

  • 德zeit sind ~ 30%的Medikamente gegen GPCRs gerichet
  • 我们有5%的钱是用来付学费的
  • Für我们的20%来自übrigen

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Für BRET empfohlene Mikroplatten-Reader

静脉Mikroplatten-Reader奥得河光度计这是一个最好的组合für BRET。Es可以在欧什麻省理工学院读者Monochromatorenverwendet werden,犹太理工学院的Empfindlichkeit。Da zwei Messungen bei unterschiedlichen Wellenlängen durchgeführt werden müssen, is in Reader mit mindestens zwei Emissionsfiltern erforderlich (dies ist z.B. bei lesen mit einem einzigen Filterwürfel mit 1 Anregungsfilter + 1 Emissionsfilter nicht möglich)。读者请访问für BRET empfohlen。